Innovative Techniken für die Forschung an extrazellulären Vesikeln

VetCore bringt in Zusammenarbeit mit dem Kau-Strebinger Lab Techniken für die EV-Forschung in einer gemeinsamen Einrichtung zusammen.

• Unterweisung und Schulung
• Technische Fragen
• Versuchsplanung (und -durchführung)
• Unterstützung bei der Datenanalyse

Allgemeine Informationen

• Die Benutzung der Geräte unterliegt einer obligatorischen Einweisung und Schulung.
• Eine Reservierung der Geräte ist über den VetCore-Buchungskalender erforderlich.
• Die Anlage befindet sich in GA06G38 (Histologie) - ein Freischaltung des elektronischen Chips für selbstständiges Arbeiten ist erforderlich.
• Spezielle Verbrauchsmaterialien müssen mitgebracht werden.

Laborausrüstung

Eppendorf CP90NX Ultrazentrifuge mit zwei Ausschwingrotoren, P32ST (40 mL max. Nennkapazität; max. 180.000 x g; K-Faktor: 198) und P40ST (13 mL max. Nennkapazität; max. 284.000 x g; K-Faktor 139). Adapter für P40ST zum Zentrifugieren von 0,9 mL-Röhrchen erhältlich.

Die Ultrazentrifugation wird für die Hochgeschwindigkeitstrennung von Nanopartikeln, Zellorganellen und Makromolekülen eingesetzt. Ein großer Vorteil der Ultrazentrifuge vor Ort ist, dass Sie Ihre Proben + Röhrchen nicht mehr auf das nächste Mikrogramm genau einstellen müssen. Eine gleichmäßige Beladung ist ausreichend, da die Zentrifuge über ein eingebautes Autotara-System verfügt, selbst bei hoher Geschwindigkeit. Eine ideale Lösung für die schnelle und sterile Probenvorbereitung.

Particle Metrix ZetaView TWIN x20 Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) bietet Ihnen eine hochmoderne Methode zur Quantifizierung der Partikelkonzentration, des hydrodynamischen Durchmessers (Größe), des Zetapotenzials und der Fluoreszenz (z. B. Laser: 488, 640).

Diese Technik wird zur Charakterisierung von Nanopartikeln in Suspension im Größenbereich von 10-2000 nm eingesetzt. Der NTA-Aufbau ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung von Partikeln unterhalb der Beugungsgrenze herkömmlicher Mikroskope, sowohl im Streu- als auch im Fluoreszenzmodus.

Unchained Labs ExoViewR200 verwendet Single Particle Interferometric Reflectance Imaging Sensing (SP-IRIS), eine optische Sensortechnologie, die Interferometrie mit Bildgebung kombiniert, um einzelne Nanopartikel bis hinunter zu 50 nm zu erkennen und zu charakterisieren, einschließlich EVs und Viren (Lentiviren usw.). Die LED-Wellenlängen/ Anregungsbereich/ Emissionsbereich unseres Geräts = blau (470/ 465-495/ 505-530 nm), grün (567/ 543-568/ 580-608 nm), rot (623/ 625-655/ 665-725 nm). Der violette Laser (415/ 415-425/ xxx nm) ist für Streuungsmessungen reserviert.

Nach einem anpassbaren Immunocapturing-Schritt können Sie die Größe und Quantifizierung kleiner EVs bestimmen und eine biomolekulare Kolokalisierungsanalyse der Oberfläche (und der Ladung) auf Ebene der einzelnen EVs durchführen. Die Erfassung und Charakterisierung von EVs direkt aus winzigen Volumina von Zellkulturüberständen und Bioflüssigkeiten ist möglich, ohne dass eine vorherige EV-Anreicherung erforderlich ist.